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美国公民、船只、商品在其境内可以享有新格拉纳达公民所能享有的种种权利（全部免税、特权和豁免），通过巴拿马地峡地美国旅客、邮件和商品也应给予同等优惠。将来在巴拿马修建任何交通设施时，其通行权或过境权应对美国政府和公民自由开放。新格拉纳达政府不得向美国公民征收高于新格拉纳达公民的通行费用，对美国商品也不得征收进口税。
在此基础上，美国政府也对新格拉纳达作出三项承诺：
1、保证巴拿马地峡地带地完全中立；
2保证未来运河的自由通行在任何时候都不会被中断或受到阻碍；
3保证新格拉纳达政府拥有巴拿马地峡的主权和财产权。
考虑到新格拉纳达政局动荡，为防意外，美国人也还留了几手。1848年美墨战争结束后，美国与墨西哥|+约》，掌握了在特万特佩克地峡开凿运河的权力。1849年，又与尼加瓜签订《斯夸尔条约》，取得了开凿尼加拉瓜运河的特权。
1849年，加利福尼亚发现金矿，经.+到各方关注，羽翼未非的美国预见到实力雄厚地英国可能会参与开凿运河的争夺，于是未雨绸缪，抢先向英国提出未来巴拿马运河中立化的建议。得到英国热烈响应。
1850419日，美国国务卿约翰.克莱顿与英国全权代表亨利.布尔沃在华盛顿签订了《美国和英国关于连接大西洋和太平洋的通航运河的条约》，规定：美国和英国均不得对前述通航运河为自己取得或维持任何排他性的控制，同意任何一方均不得在该运河的要冲地区或附近建立或维持任何要塞。也不得对中美洲的任何部分实施占领和统治。
条约承诺，当缔约双方发生战争时，任何一方也不能向对方封锁运河，美、英两国共同负责保护任何一方修建运河工程的财产不受侵犯。运河完工时，双方将保护它，使其不受阻碍、劫夺或不公允地没收，双方共同保证运河的中立，以使该运河永久自由开放，所投入的资本稳固可靠。通过这一条约，美国排除了英国以武力独占运河的危险。
然而。《克莱顿－布尔沃条约》是一个充满妥协和折衷地外交文件，存在许多漏洞，它虽然使未来的巴拿马运河中立化，但文字含糊不清、模棱两可，执行中存在极大的争议。1850年，美国耗资750万美元在巴拿马地峡修建连接两大洋的铁路，历时五年完工，1849年，一家美国公司准备开凿以格雷敦为终点地横贯尼加拉瓜的运河时，英国人援引《克莱顿－布尔沃条约》，指责美国侵犯了受英国保护的印第安人莫斯基托王国的合法权益，致使工程下马，这个挫折让美国人认识到也许在巴拿马地峡开凿运河是一个更为合算的选择。
按照美国与新格拉纳达签订的条约，从1846起，美国公民获得穿过巴拿马地峡的权力，潮水般涌来地美国游客带来了美元，但在对北方强邻怀有恐惧的巴拿马人看来，这种经济上的输血却几近侵略，发生的一起看似偶然的流血事件就是证明。
当415，一名美国人在巴拿马火车站购买西瓜时与摊主发生纠纷，拒付货款，双方遂起争端，由于围观的巴拿马人和美国人情绪激动，冲突很快演变成一场持续数小时的枪战。作客的美国人自然难讨便宜，死伤31人，巴拿马方面伤亡15人。事件发生后，美国的特派全权使警告新格拉纳达政府：如果拒绝迅速赔偿损失，美国将立即占领巴拿马地峡。对此，新格拉纳达总统的回答很简单，但却形象地反映了弱小民族的微妙心态：
硬要使任何一个地峡的过客有权向我们的公民开枪，而我们的公民必须逆来顺受，这是极不公平的，也是横行霸道的，容忍这种屈辱的民族是不配生存的！
然而，爱国的冲动和**的表白无法掩饰国家的虚弱。7月，国巡洋舰“独立”号和“圣玛丽”.号驶抵巴拿马，9月19日，160美国海军陆战队员登陆，占领了巴拿马火车站，这才让激动的新格林纳达政府平静下来。
1857年2。两国开始谈判，美国代表提出巴拿马城与科隆城应成为自治地自由港。两国共管以巴拿马铁路为中心的宽40公里地地峡，巴拿马湾的某些岛屿要割让给美国，赔偿美国公民在事件中的一切损失。美国代表也表示，如果新格拉纳达政府接受这些条件，美国愿支付美元作为补偿。然而，新格林纳达政府显得毫无诚意，除赔偿外。它拒绝接受其它条件，谈判一直拖延到1865美国南北战争结束后，才正式达成条约，1861年已改名为哥伦比亚.元。
1867年1月23，因1848年的条约行~重新谈判。12，哥伦比亚将新约草案交给美国审议，该条约规定：哥伦比亚同意美国承建巴拿马运河。提供修建运河的地区，对未来运河的中立，由两国实行共同防御，但此时地美国忙于南北战争的重建和年的总统选举。因此迟至1869年1月14